実験プロトコール

プロトコールタイトル

関連する調製方法クマシーブリリアントブルー（CBB）染色液と脱色液の調整

プロトコール概要

電気泳動したタンパク質の染色方法にはクマシーブリリアントブルー染色（CBB染色）や銀染色がよく使用され、CBB染色は検出感度は銀染色よりも低くなりますが、手軽に行えるため広く用いられています。クマシーブリリアントブルーにはRとGがあり、どちらも使用できますがRのほうがやや一般的に用いられています。

使用する物質

手順

手順	内容
手順1	固定液　100 ml用：　＜用時調整＞　50 mlのメタノール、10 mlの酢酸、50 mlの水を混ぜます。
手順2	CBB染色液　1L用　（濃度　0.25% (w/v) Brilliant Blue R, 40% (v/v) methanol and 7% (v/v) acetic acid）：　400 mlのメタノール、70 mlの酢酸、530 mlの水を混ぜ、2.5 gのBrilliant Blue Rを溶解します。溶けにくいのでよく撹拌します。室温で保存可能です。
手順3	脱色液　1L用：　＜用時調整＞　50 mlのメタノール、70 mlの酢酸、880 mlの水を混ぜます。

手順のリンク

プロトコール注意事項

染色液の調整は手袋をして行って下さい。

プロトコールオプション

ブロッティング後のメンブレンの染色にはCBBでも染色できますが、可逆的に染色可能なポンソーＳ（Ponceau-S）がよく用いられます。