実験プロトコール

検索トップページ

製品カタログ（目的別）

実験プロトコール目次

プロトコールタイトル

免疫沈降（IP）

プロトコール概要

免疫沈降（IP）は最も広く使われている免疫化学的手法のひとつです。SDS-PAGEやウェスタンブロットの前に行われる免疫沈降は、様々なアプリケーション（タンパク質抗原の分子量測定、タンパク質タンパク質相互作用の研究、特異的酵素活性の決定、タンパク質翻訳後修飾のモニタリング、タンパク質存在量の決定など）において汎用されます。IP法はサンプルを10,000倍まで濃縮できることから、他の方法では検出が困難な稀少なタンパク質の検出も可能です。

使用する物質

使用する試薬	製品例	必要量	注意事項
プロテアーゼインヒビターカクテル	P8340		推奨。
Protein G免疫沈降キット	IP50		Protein Gによる免疫沈降用の便利なキット製品です。
グリセロール	G5516
RIPAバッファー	R0278		製品番号R0278はReady-to-useの製品です。
サンプルバッファー（Laemmli）	S3401		製品番号S3401は2-メルカプトエタノールを含む、2ｘサンプルバッファーです。
塩化ナトリウム	S5150		製品番号S5150は5M溶液です。
Triton X-100	T8787
ホスファターゼインヒビターカクテル	P2850		リン酸化に関する場合に特に推奨。
プロテインLアガロース	P3351		抗体の免疫動物やイムノグロブリンのサブクラスによって選択します。
HEPES	H3537		製品番号H3537は1M溶液です。
プロテインGアガロース	P3296		抗体の免疫動物やイムノグロブリンのサブクラスによって選択します。
プロテインAアガロース	P3476		抗体の免疫動物やイムノグロブリンのサブクラスによって選択します。

手順

なし

手順のリンク

★免疫沈降の手順、プロテインA, Gのアフィニティ一覧表

プロトコール注意事項

プロトコールオプション